Набор реагентов «АЛТ-UTS» предназначен для определения активности аланинаминотрансферазы в сыворотке или плазме крови человека в клинико-диагностических и биохимических лабораториях для целей диагностики заболеваний и контроля проводимого лечения пациентов.
Набор реагентов поставляется в виде двух растворов.
Реагент 1:
- Трис (рН 7,3) – 150 ммоль/л.
- Лактатдегидрогеназа >1350 МЕ/л.
- L-Аланин – 750 ммоль/л.
Реагент 2:
- НАДН2 – 1,3 ммоль/л.
- 2-оксоглютарат – 75 ммоль/л.
Набор реагентов «АЛТ-UTS» разработан на основе стандартного кинетического УФ-метода (IFCC) без пиридоксаль-5-фосфата. АЛТ катализирует реакцию переноса аминогруппы с аланина на оксоглютарат, образуя пируват и глютамат. Затем в присутствии лактатдегидрогеназы (ЛДГ) происходит восстановление пирувата до лактата за счет окисления НАДН2.
Скорость окисления НАДН2 прямо пропорциональна активности АЛТ и измеряется фотометрически при 340 нм.
Фотометрическое измерение основано на наличии максимума поглощения света на длине волны 340 нм молекулами НАДН2. Все остальные компоненты реакционной смеси слабо поглощают свет на этой длине волны. Таким образом, уменьшение оптической плотности реакционной смеси на длине волны 340 нм пропорционально уменьшению концентрации НАДН2. При достаточно высокой концентрации субстратов АЛТ, НАДН2 и высокой активности ЛДГ скорость уменьшения концентрации НАДН2 и, следовательно, уменьшение оптической плотности реакционной смеси будет пропорциональна активности АЛТ.
