Агар маннит-солевой – селективная среда, которая готовится в соответствии с рекомендациями Чапмена для выделения предположительных патогенных стафилококков.
Большинство других бактерий ингибируются высокой концентрацией хлорида натрия.
Пептоновая смесь и мясной экстракт являются источниками питательных веществ, необходимых для роста микроорганизмов: азота, витаминов, минеральных солей и аминокислот.
Маннит – углеводный источник энергии; феноловый красный – индикатор pH. Хлорид натрия поддерживает осмотический баланс.
В результате утилизации маннита бактериями образуются кислые продукты, которые изменяют цвет среды с розового на желтый. Благодаря высокой концентрации хлорида натрия среду можно инокулировать большим количеством материала.
Метод обнаружения Staphylococcus aureus
Европейская Фармакопея рекомендует следующий метод обнаружения Staphylococcus aureus. После инкубации при 30–35°C в течение 18–24 часов в Бульоне триптиказеино-соевом (кат. № 1224) произвести посев на чашки с Агаром манит-солевым, инкубировать при 30–35°C в течение 18–72 часов для анализа стимуляции роста. В качестве негативного контроля также инокулировать и инкубировать Escherichia coli АТСС 8739.
Маннит-ферментирующие патогенные стафилококки будут представлены большими колониями, окруженными желтой зоной. Непатогенные стафилококки имеют вид небольших колоний, окруженных красным либо фиолетовым ореолом. На возможное присутствие S. aureus указывает присутствие желтых/белых колоний, окруженных желтой зоной.
Для подтверждения необходимо проведение идентификационного теста.
Добавление 5% Эмульсии яичного желтка (кат. № 5152) позволяет обнаружить липазную активность стафилококков, а также ферментацию маннита. Высокая концентрация соли в среде осветляет эмульсию яичного желтка, и образование липазы обнаруживается посредством образования желтой матовой зоны вокруг колоний стафилококков.
Это явление наряду с положительным коагулазным тестом, подтверждает, что исследуемые микроорганизмы являются патогенными стафилококками.
Инокулировать и инкубировать при 35±2°C и наблюдать через 18–24 часа и еще раз после 48 часов.
